Si bien Luis Pedro Barrueto nos colabora con artículos orientados a nuestros lectores, esta vez presentamos un artículo publicado (originalmente en inglés) para una audiencia internacional y más especializada, él tiene ya bastante presencia y gran prestigio. Lo anterior para crear conciencia que la investigación es fundamental para el país.
Algunas veces en el ámbito del 'cultivo de plantas in vitro', es necesario colectar material de plantas adultas del campo o bosque nativo, con potencial agronómico o forestal.
En estos casos, hay que procurar estacas o ramos epicórmicos, flexibles, saludables y con presencia de yemas latentes o en dormancia.
Después, este material es llevado al laboratorio y en una Cámara de Flujo Laminar, cortados en segmentos menores y sometidos a una asepsia rigurosa, para eliminar los posibles patógenos
Tal asepsia, consiste en lavar el material con agua de la llave, después colocarlos en una solución de hipoclorito de sodio (agua sanitaria), a continuación, lavar este material con agua destilada y esterilizadas.
Si fuera el caso, tratar el material con algún funguicida o antibiótico con un delineamiento estadístico, por ejemplo, Cuadrados Latinos, en frascos Erlenmeyer sometidos a agitación rotatoria.
Una vez esterilizados, los segmentos de ramas, son cortados en pequeños trozos (explantes) de 2 a 5 cm de largo aproximadamente, con el propósito de insertarlos verticalmente en el medio nutritivo presente en los tubos de ensayos, y así, disponer una cantidad razonable de estacas libres de patógenos.
Bajo estas condiciones, las yemas de las estacas brotarán manteniendo sus juveniles características, bajo luz y temperatura adecuados del laboratorio.
De estas brotaciones, será posible obtener nuevos explantes: hojas y segmentos de ejes caulinares, para propagar este material genético, vía brotes adventicios de callos, o, embriones somáticos y de esta forma, producir miles de plantas.
Fotos: Estaca de Mandioca(*) y Eucalyptus brotando in vitro en laboratorio, favorecidos por la ausencia de dominancia apical. (L. Pedro Barrueto Cid. (Embrapa/Cenargen. Brasília, DF-Brasil).
(*) Mandioca una planta tropical de la familia de la Euphorbiaceas, cuya raíz es rica em almidón, y sirve de alimento a millones de persona en los trópicos, en lugar de nuestra papa común
VERSIÓN ORIGINAL DEL ARTÍCULO:
MICROCUTTING CULTURES
Some genotypes, in plant tissue culture sometimes it is necessary to begin from adult woody plants of the field.
In this case, to look for juvenile and vigorous cuttings or stem epicormic softwood segment, both, with healthy latent buds.
Hence, in laboratory, (laminar flow cabinet) segments excised of this material, are surface disinfected, with basic procedures, using tap water, hypochlorite solution, (commercial bleach), rinsed in sterile DDH20 and submitted to antibiotic or fungicide, Latin Square arrangement, in Erlenmeyer flask (shaker agitation).
Afterward of surface sterilizations, segments of 2 – 5 cm ~ of length, are upright inserted in agar nutrient medium in the culture tubes, so, to dispose a pathogen-free stock.
In addition, latent buds sprouting, with juvenile characteristics under adequate light and temperature conditions.
In practice, from these sprouting buds will be possible to obtain suitable news explants: leaves & nodes, to propagate this new phenotype via calluses by adventitious shoots or somatic embryogenesis development.
Pictures. Cassava & Eucalyptus microcutting, sprouting under in vitro conditions by absence of the apical dominance. (L. Pedro Barrueto Cid. Embrapa/Cenargen. Brasília, DF-Brazil).
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